Pipette automatique
Une pipette automatique ou micropipette ou pipetteur automatique est un dispositif de pipettage de précision utilisé entre autres en chimie analytique et en biologie moléculaire.
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Équipement de laboratoire - Équipement de laboratoire de biologie moléculaire
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Une pipette automatique ou micropipette ou pipetteur automatique est un dispositif de pipettage de précision utilisé entre autres en chimie analytique et en biologie moléculaire. Parmi les marques, citons Pipetman® (marque déposée de Gilson®) et Finnpipet®.
Ce sont des dispositifs actionnant des pistons. La modification de la longueur de la colonne d'air au sein de l'appareil permet d'aspirer ou de chasser des volumes de liquides avec une grande précision.
Une molette autorise l'utilisateur de règler le volume à prélever, avec un indicateur à chiffres.
Il existe le plus souvent une gamme de modèles selon le volume à pipetter et la précision du prélèvement à effectuer :
- P5000 : sert à pipetter jusqu'à 5 ml de solution ;
- P1000 : sert à pipetter de 200 à 1 000 µl de solution ;
- P200 : sert à pipetter de 20 à 200 µl ;
- P20 : sert à pipetter de 10 à 20 µl ;
- P10 : sert à pipetter de 0.5 à 10 µl.
Pointes
Il est indispensable d'avoir des embouts (ou "pointes" ou "cônes") qui soient adaptés à la micropipette utilisée. Ces embouts doivent être le plus effilés envisageable, surtout pour les petits volumes, pour mieux voir le volume prélevé. Ils sont le plus souvent disposés dans des boites stérilisables, pourvues d'un plateau percé, où on les met.
Il existe des embouts pourvus d'un filtre de coton. Ils permettent d'éviter la contamination pouvant provenir du plastique de la pipette ou de la colonne d'air.
Il existe aussi des boîtes en paquet stérile déjà remplies d'embouts. Ces boîtes sont jetables.
On prélève un embout simplement en appliquant le bout de la micropipette dans le col de l'embout. En appuyant légèrement, l'embout s'enfonce et peut être retiré de la boîte.
Un éjecteur de cônes sert à jeter l'embout souillé de la micropipette sans se servir de ses mains.
Utilisation
On débute par règler le volume à prélever sans dépasser la portée de la pipette : c'est-à-dire la tranche de volumes pour laquelle elle est conçue.
A titre d'exemple, une "P20" (10 µl à 20 µl) ne doit pas être réglée à moins de 10 µl ou à plus de 20 µl. C'est aussi entre ces deux valeurs que la précision est la meilleure.
Pour pipetter, on tient la pipette automatique par le corps avec les quatre doigts de la main droite (si on est droitier) et le pouce permet de actionner le piston ou l'éjecteur de cônes.
Les pipettes automatiques sont pourvues de deux crans selon la force qu'on applique sur le piston :
- le premier permet d'aspirer le liquide avec la bonne pression correspondant au volume choisi ;
- le second permet l'éjection du liquide prélevé pour que rien ne reste dans le cône. En effet, un liquide visqueux (chargé par exemple en protéines ou acides nucléiques) a tendance à adhérer aux parois.
Il faut prendre garde à ne en particulier pas prélever avec le second cran (c'est-à-dire dépasser le premier cran et atteindre le second), car dans ce cas un volume énormément trop important est aspiré, de plus le liquide est susceptible d'entrer dans la mécanique de la pipette et de l'endommager.
Quand on cherche à faire des prélèvements précis, il est important d'immerger le cône au minimum pour éviter que du liquide n'adhère hors du cône.
On se sert de la main gauche pour tenir, ouvrir ou fermer les microtubes.
Réglage
Une petite clé sert à serrer ou desserrer une vis modifiant la longueur de la colonne d'air et sert à régler la micropipette.
Les pipettes automatiques doivent être régulièrement calibrées pour que le volume qu'elles prélèvent reste précis.
Entretien
La plupart du temps, les pipettes automatiques peuvent être stérilisées avec la technique d'autoclavage, courante en biologie.
Constructeurs
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Micropipettes multicanaux
Permettent d'effectuer 8 ou 12 prélèvements d'un coup pour remplir plus rapidement une plaque 96 puits ou une plaque de microdilutions. La solution à distribuer sur la plaque est versée dans une petite auge en plastique stérile jetable.
Micropipette électronique
Le manche de la micropipette contient un moteur électrique qui effectue le pistonnage. Des boutons permettent d'effectuer une programmation avec un écran à cristaux liquides. Un gros bouton sert à lancer le programme entré de pipettage. Le repose-pipette est relié au secteur et sert de base de rechargement de la batterie de l'appareil.
Voir aussi
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La version présentée ici à été extraite depuis cette source le 30/11/2010.
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